Expression of ERG11, ERG3, MDR1 and CDR1 genes in Candida tropicalis / Expresión de los genes ERG11, ERG3, MDR1 y CDR1 en Candida tropicalis

INTRODUCTION: Drug resistance to azoles is a growing problem in the Candida genus. OBJECTIVE: To analyze molecularly the genes responsible for fluconazole resistance in Candida tropicalis strains. MATERIALS AND METHODS: Nineteen strains, with and without exposure to fluconazole, were selected for this study. The expression of MDR1, CDR1, ERG11, and ERG3 genes was analyzed in sensitive, dose-dependent sensitive, and resistant strains exposed to different concentrations of the antifungal drug. RESULTS: MDR1, ERG11 and ERG3 genes were significantly overexpressed in the different sensitivity groups. CDR1 gene expression was not statistically significant among the studied groups. Seven of the eight fluconazole-resistant strains showed overexpression of one or more of the analyzed genes. In some dose-dependent sensitive strains, we found overexpression of CDR1, ERG11, and ERG3. CONCLUSION: The frequency of overexpression of ERG11 and ERG3 genes indicates that they are related to resistance. However, the finding of dose-dependent resistant/sensitive strains without overexpression of these genes suggests that they are not exclusive to this phenomenon. More basic research is needed to study other potentially involved genes in the resistance mechanism to fluconazole.

Introducción: La farmacorresistencia a los azoles es un problema creciente en el género Candida. Objetivo: Analizar molecularmente los genes responsables de la resistencia a fluconazol en cepas de Candida tropicalis. Materiales y métodos: Para este estudio, se seleccionaron 19 cepas, con exposición a fluconazol y sin ella. Se analizó la expresión de los genes MDR1, CDR1, ERG11 y ERG3 en cepas sensibles, sensibles dependiente de la dosis, y resistentes, previamente expuestas a diferentes concentraciones del fármaco antifúngico. Resultados: Se encontró que los genes MDR1, ERG11 y ERG3 estaban significativamente sobreexpresados en los diferentes grupos de sensibilidad. La expresión del gen CDR1 no fue estadísticamente significativa entre los grupos estudiados. Siete de las ocho cepas resistentes a fluconazol mostraron sobreexpresión de uno o más de los genes analizados. En algunas cepas sensibles dependientes de la dosis, se encontró sobreexpresión de CDR1, ERG11 y ERG3. Conclusión: La sobreexpresión de los genes ERG11 y ERG3 indica que están relacionados con la resistencia de las cepas de Candida. Sin embargo, el hallazgo de cepas resistentes o sensibles según la dosis, sin sobreexpresión de estos genes, sugiere que pueden existir otros genes involucrados en este fenómeno. Se necesitan más investigaciones básicas que contribuyan al estudio de otros genes potencialmente involucrados en el mecanismo de resistencia al fluconazol.

Expression of ERG11, ERG3, MDR1 and CDR1 genes in Candida tropicalis

Introduction. Drug resistance to azoles is a growing problem in the Candida genus. Objective. To analyze molecularly the genes responsible for fluconazole resistance in Candida tropicalis strains. Materials and methods. Nineteen strains, with and without exposure to fluconazole, were selected for this study. The expression of MDR1, CDR1, ERG11, and ERG3 genes was analyzed in sensitive, dose-dependent sensitive, and resistant strains exposed to different concentrations of the antifungal drug. Results. MDR1, ERG11 and ERG3 genes were significantly overexpressed in the different sensitivity groups. CDR1 gene expression was not statistically significant among the studied groups. Seven of the eight fluconazole-resistant strains showed overexpression of one or more of the analyzed genes. In some dose-dependent sensitive strains, we found overexpression of CDR1, ERG11, and ERG3. Conclusion. The frequency of overexpression of ERG11 and ERG3 genes indicates that they are related to resistance. However, the finding of dose-dependent resistant/sensitive strains without overexpression of these genes suggests that they are not exclusive to this phenomenon. More basic research is needed to study other potentially involved genes in the resistance mechanism to fluconazole.

Introducción. La farmacorresistencia a los azoles es un problema creciente en el género Candida. Objetivo. Analizar molecularmente los genes responsables de la resistencia a fluconazol en cepas de Candida tropicalis. Materiales y métodos. Para este estudio, se seleccionaron 19 cepas, con exposición a fluconazol y sin ella. Se analizó la expresión de los genes MDR1, CDR1, ERG11 y ERG3 en cepas sensibles, sensibles dependiente de la dosis, y resistentes, previamente expuestas a diferentes concentraciones del fármaco antifúngico. Resultados. Se encontró que los genes MDR1, ERG11 y ERG3 estaban significativamente sobreexpresados en los diferentes grupos de sensibilidad. La expresión del gen CDR1 no fue estadísticamente significativa entre los grupos estudiados. Siete de las ocho cepas resistentes a fluconazol mostraron sobreexpresión de uno o más de los genes analizados. En algunas cepas sensibles dependientes de la dosis, se encontró sobreexpresión de CDR1, ERG11 y ERG3. Conclusión. La sobreexpresión de los genes ERG11 y ERG3 indica que están relacionados con la resistencia de las cepas de Candida. Sin embargo, el hallazgo de cepas resistentes o sensibles según la dosis, sin sobreexpresión de estos genes, sugiere que pueden existir otros genes involucrados en este fenómeno. Se necesitan más investigaciones básicas que contribuyan al estudio de otros genes potencialmente involucrados en el mecanismo de resistencia al fluconazol.

Infarto agudo de miocardio tipo 2: desafíos en la práctica clínica

El infarto de miocardio tipo 2 se produce como consecuencia del desequilibrio entre la relación aporte/consumo de oxígeno miocárdico, que puede ser secundario a la isquemia, debida a mayor demanda de oxígeno del miocardio o como consecuencia de la disminución del aporte en él. Se realiza una revisión actualizada de la literatura acerca del infarto de miocardio tipo 2. Se revisaron aspectos relacionados con los criterios diagnósticos, la fisiopatología, las características clínicas y el tratamiento, para lo cual se realizó una revisión de los principales artículos publicados de enero del 2017 a enero del 2022, en idiomas inglés y español, se consultaron las bases de datos: Pubmed, Scielo y el buscador Google Scholar. Se escogieron 51 artículos. Las evidencias demuestran que existen deficiencias en el conocimiento del infarto agudo de miocardio tipo 2, que dificultan su adecuado diagnóstico, tratamiento y pronóstico. Se recomienda la realización de estudios prospectivos para una mayor evaluación de la prevalencia, la fisiopatología y el manejo de esta entidad.

Type 2 myocardial infarction occurs as a consequence of the imbalance between the myocardial oxygen supply/consumption ratio, which may be secondary to ischemia, due to increased myocardial oxygen demand or as a consequence of decreased oxygen supply. An updated review of the literature on type 2 myocardial infarction is carried out. Aspects related to diagnostic criteria, pathophysiology, clinical characteristics and treatment were reviewed, for which a review of the main articles published in January from 2017 to January 2022, in English and Spanish, the databases were consulted: Pubmed, Scielo and the Google Scholar search engine. 51 articles were chosen. The evidence shows that there are deficiencies in the knowledge of type 2 acute myocardial infarction, which hinder its proper diagnosis, treatment and prognosis. Prospective studies are recommended for further evaluation of the prevalence, pathophysiology, and management of this entity.

BRD9 Inhibition by Natural Polyphenols Targets DNA Damage/Repair and Apoptosis in Human Colon Cancer Cells.

Epigenetic mechanisms play an important role in the etiology of colorectal cancer (CRC) and other malignancies due, in part, to deregulated bromodomain (BRD) functions. Inhibitors of the bromodomain and extraterminal (BET) family have entered into clinical trials as anticancer agents, and interest has grown in other acetyl 'reader' proteins as therapeutic targets, including non-BET member bromodomain-containing protein 9 (BRD9). We report here that overexpression of BRD9 is associated with poor prognosis in CRC patients, and that siRNA-mediated knockdown of BRD9 decreased cell viability and activated apoptosis in human colon cancer cells, coincident with increased DNA damage. Seeking natural compounds as BRD9 antagonists, molecular docking in silico identified several polyphenols such as Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), Equol, Quercetin, and Aspalathin, with favorable binding energies, supported by BROMOscan® (DiscoverX) and isothermal titration calorimetry experiments. Polyphenols mimicked BRD9 knockdown and iBRD9 treatment in reducing colon cancer cell viability, inhibiting colony formation, and enhancing DNA damage and apoptosis. Normal colonic epithelial cells were unaffected, signifying cancer-specific effects. These findings suggest that natural polyphenols recognize and target BRD9 for inhibition, and might serve as useful lead compounds for bromodomain therapeutics in the clinical setting.

Metabolomics of Acute vs. Chronic Spinach Intake in an Apc-Mutant Genetic Background: Linoleate and Butanoate Metabolites Targeting HDAC Activity and IFN-γ Signaling.

There is growing interest in the crosstalk between the gut microbiome, host metabolomic features, and disease pathogenesis. The current investigation compared long-term (26 week) and acute (3 day) dietary spinach intake in a genetic model of colorectal cancer. Metabolomic analyses in the polyposis in rat colon (Pirc) model and in wild-type animals corroborated key contributions to anticancer outcomes by spinach-derived linoleate bioactives and a butanoate metabolite linked to increased α-diversity of the gut microbiome. Combining linoleate and butanoate metabolites in human colon cancer cells revealed enhanced apoptosis and reduced cell viability, paralleling the apoptosis induction in colon tumors from rats given long-term spinach treatment. Mechanistic studies in cell-based assays and in vivo implicated the linoleate and butanoate metabolites in targeting histone deacetylase (HDAC) activity and the interferon-γ (IFN-γ) signaling axis. Clinical translation of these findings to at-risk patients might provide valuable quality-of-life benefits by delaying surgical interventions and drug therapies with adverse side effects.

Frequency of antibodies and seroconversion against Rickettsia spp in patients consulting health institutions in the department of Caldas, Colombia, 2016-2019 / [Frecuencia de anticuerpos y seroconversión frente a Rickettsia spp. en pacientes atendidos en instituciones de salud del departamento de Caldas, Colombia, 2016-2019].

Introduction: Rickettsioses are zoonotic diseases transmitted by arthropods acting as vectors and reservoirs. Disease symptoms are nonspecific and, therefore, their clinical diagnosis is difficult. Indirect immunofluorescence (IFA) is the gold standard assay for diagnosis. The interest for conducting studies on these pathologies has resurfaced in Colombia since 2001; besides, previous studies have evidenced cases of rickettsiosis in the north of the department of Caldas. Objective: To establish the frequency of antibodies and seroconversion against Rickettsia spp. In patients consulting health institutions in Caldas, Colombia, from 2016 to 2019. Materials and methods: We conducted a quantitative, observational, and descriptive study on a non-probabilistic sample of 175 patients with symptoms compatible with rickettsiosis who consulted in different municipalities of Caldas, Colombia; IFA was performed to detect antibodies in the acute and convalescent phases against Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, and Rickettsia felis. Results: The average age of the patients was 31 years. The municipalities with the highest proportion of seropositive cases were Belalcázar, Chinchiná, Filadelfia, La Dorada, La Merced, and Manizales; 66% of patients owned pets and 12% reported arthropod bites. The most frequent signs and symptoms were headache (69.7%), arthromyalgia (60%), and fever (58.2%). IgG seroprevalence was 60% for R. rickettsii, 47.9% for R. typhi, and, and 24% for R. felis. Eight patients presented seroconversion. Conclusion: We found evidence of the circulation of Rickettsia species from the spotted fever group and the typhus group associated with human cases in Caldas.

Introducción. Las rickettsiosis son enfermedades zoonóticas transmitidas por artrópodos que cumplen el papel de vectores y reservorios, y cuyos síntomas son inespecíficos, por lo que su diagnóstico clínico es difícil. La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es el método de referencia para el diagnóstico. En Colombia, ha resurgido el interés por su estudio por los casos de rickettsiosis detectados en el norte del departamento de Caldas a partir del 2001. Objetivo. Establecer la frecuencia de anticuerpos y la seroconversión contra Rickettsia spp. en pacientes atendidos en instituciones de salud del departamento de Caldas, Colombia, entre 2016 y 2019. Materiales y métodos. Se hizo un estudio de diseño cuantitativo, observacional y descriptivo, con una muestra no probabilística de 175 pacientes atendidos en diferentes municipios de Caldas, a quienes se les realizó IFI para la detección de anticuerpos en fase aguda y convaleciente contra Rickettsia rickettsii, R. typhi y R. felis. Resultados. El promedio de edad de los pacientes fue de 31 años. Los municipios con mayor proporción de seropositivos fueron Belalcázar, Chinchiná, Filadelfia, La Dorada, La Merced y Manizales. El 66 % tenía mascotas y el 12 % reportó picaduras por artrópodos. Los signos y síntomas más frecuentes fueron cefalea (69,7 %), artromialgia (60 %), y fiebre (58,2 %). La seroprevalencia por IgG fue de 60 % para R. rickettsii, 47,9 % para R. typhi y 24 % para R. felis. Ocho pacientes presentaron seroconversión. Conclusión. Se encontró evidencia de la circulación de rickettsias del grupo de las fiebres manchadas y del grupo del tifus asociada con casos humanos en el departamento de Caldas.

Frecuencia de anticuerpos y seroconversión frente a Rickettsia spp. en pacientes atendidos en instituciones de salud del departamento de Caldas, Colombia, 2016-2019 / Frequency of antibodies and seroconversion against Rickettsia spp in patients consulting health institutions in the department of Caldas, Colombia, 2016-2019

Resumen | Introducción. Las rickettsiosis son enfermedades zoonóticas transmitidas por artrópodos que cumplen el papel de vectores y reservorios, y cuyos síntomas son inespecíficos, por lo que su diagnóstico clínico es difícil. La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es el método de referencia para el diagnóstico. En Colombia, ha resurgido el interés por su estudio por los casos de rickettsiosis detectados en el norte del departamento de Caldas a partir del 2001. Objetivo. Establecer la frecuencia de anticuerpos y la seroconversión contra Rickettsia spp. en pacientes atendidos en instituciones de salud del departamento de Caldas, Colombia, entre 2016 y 2019. Materiales y métodos. Se hizo un estudio de diseño cuantitativo, observacional y descriptivo, con una muestra no probabilística de 175 pacientes atendidos en diferentes municipios de Caldas, a quienes se les realizó IFI para la detección de anticuerpos en fase aguda y convaleciente contra Rickettsia rickettsii, R. typhi y R. felis. Resultados. El promedio de edad de los pacientes fue de 31 años. Los municipios con mayor proporción de seropositivos fueron Belalcázar, Chinchiná, Filadelfia, La Dorada, La Merced y Manizales. El 66 % tenía mascotas y el 12 % reportó picaduras por artrópodos. Los signos y síntomas más frecuentes fueron cefalea (69,7 %), artromialgia (60 %), y fiebre (58,2 %). La seroprevalencia por IgG fue de 60 % para R. rickettsii, 47,9 % para R. typhi y 24 % para R. felis. Ocho pacientes presentaron seroconversión. Conclusión. Se encontró evidencia de la circulación de rickettsias del grupo de las fiebres manchadas y del grupo del tifus asociada con casos humanos en el departamento de Caldas.

Abstract | Introduction: Rickettsioses are zoonotic diseases transmitted by arthropods acting as vectors and reservoirs. Disease symptoms are nonspecific and, therefore, their clinical diagnosis is difficult. Indirect immunofluorescence (IFA) is the gold standard assay for diagnosis. The interest for conducting studies on these pathologies has resurfaced in Colombia since 2001; besides, previous studies have evidenced cases of rickettsiosis in the north of the department of Caldas. Objective: To establish the frequency of antibodies and seroconversion against Rickettsia spp. In patients consulting health institutions in Caldas, Colombia, from 2016 to 2019. Materials and methods: We conducted a quantitative, observational, and descriptive study on a non-probabilistic sample of 175 patients with symptoms compatible with rickettsiosis who consulted in different municipalities of Caldas, Colombia; IFA was performed to detect antibodies in the acute and convalescent phases against Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, and Rickettsia felis. Results: The average age of the patients was 31 years. The municipalities with the highest proportion of seropositive cases were Belalcázar, Chinchiná, Filadelfia, La Dorada, La Merced, and Manizales; 66% of patients owned pets and 12% reported arthropod bites. The most frequent signs and symptoms were headache (69.7%), arthromyalgia (60%), and fever (58.2%). IgG seroprevalence was 60% for R. rickettsii, 47.9% for R. typhi, and, and 24% for R. felis. Eight patients presented seroconversion. Conclusion: We found evidence of the circulation of Rickettsia species from the spotted fever group and the typhus group associated with human cases in Caldas.

Deacetylase Plus Bromodomain Inhibition Downregulates ERCC2 and Suppresses the Growth of Metastatic Colon Cancer Cells.

There is growing evidence that DNA repair factors have clinical value for cancer treatment. Nucleotide excision repair (NER) proteins, including excision repair cross-complementation group 2 (ERCC2), play a critical role in maintaining genome integrity. Here, we examined ERCC2 expression following epigenetic combination drug treatment. Attention was drawn to ERCC2 for three reasons. First, from online databases, colorectal cancer (CRC) patients exhibited significantly reduced survival when ERCC2 was overexpressed in colon tumors. Second, ERCC2 was the most highly downregulated RNA transcript in human colon cancer cells, plus Ercc2 in rat tumors, after treatment with the histone deacetylase 3 (HDAC3) inhibitor sulforaphane (SFN) plus JQ1, which is an inhibitor of the bromodomain and extraterminal domain (BET) family. Third, as reported here, RNA-sequencing of polyposis in rat colon (Pirc) polyps following treatment of rats with JQ1 plus 6-methylsulfinylhexyl isothiocyanate (6-SFN) identified Ercc2 as the most highly downregulated gene. The current work also defined promising second-generation epigenetic drug combinations with enhanced synergy and efficacy, especially in metastasis-lineage colon cancer cells cultured as 3D spheroids and xenografts. This investigation adds to the growing interest in combination approaches that target epigenetic 'readers', 'writers', and 'erasers' that are deregulated in cancer and other pathologies, providing new avenues for precision oncology and cancer interception.

Aortic acceleration as a noninvasive index of left ventricular contractility in the mouse.

The maximum value of the first derivative of the invasively measured left ventricular (LV) pressure (+ dP/dtmax or P') is often used to quantify LV contractility, which in mice is limited to a single terminal study. Thus, determination of P' in mouse longitudinal/serial studies requires a group of mice at each desired time point resulting in "pseudo" serial measurements. Alternatively, a noninvasive surrogate for P' will allow for repeated measurements on the same group of mice, thereby minimizing physiological variability and requiring fewer animals. In this study we evaluated aortic acceleration and other parameters of aortic flow velocity as noninvasive indices of LV contractility in mice. We simultaneously measured LV pressure invasively with an intravascular pressure catheter and aortic flow velocity noninvasively with a pulsed Doppler probe in mice, at baseline and after the administration of the positive inotrope, dobutamine. Regression analysis of P' versus peak aortic velocity (vp), peak velocity squared/rise time (vp2/T), peak (+ dvp/dt or v'p) and mean (+ dvm/dt or v'm) aortic acceleration showed a high degree of association (P' versus: vp, r2 = 0.77; vp2/T, r2 = 0.86; v'p, r2 = 0.80; and v'm, r2 = 0.89). The results suggest that mean or peak aortic acceleration or the other parameters may be used as a noninvasive index of LV contractility.

Quantitative analysis of the expression of fluconazole-resistant genes in strains of Candida albicans isolated from elderly people at their admission in an intensive care unit in Manizales, Colombia / [Análisis cuantitativo de la expresión de genes de resistencia a fluconazol en cepas de Candida albicans aisladas al ingreso de adultos mayores a una unidad de cuidados intensivos de Manizales, Colombia].

Introducción. Las infecciones oportunistas asociadas con Candida albicans han tenido gran repercusión en la salud pública por la mortalidad que generan en determinados grupos poblacionales. Aunque existen tratamientos farmacológicos disponibles, es evidente el aumento de la resistencia desarrollada por el agente patógeno, por lo que la determinación de los mecanismos de resistencia de las cepas presentes en las áreas hospitalarias es importante, ya que permitiría plantear mejores esquemas de tratamiento. Objetivo. Analizar la expresión de los genes ERG11, CDR1 y MDR1 en cepas de C. albicans aisladas de adultos mayores a su ingreso en la unidad de cuidados intensivos del Hospital Santa Sofía de Manizales, Colombia. Materiales y métodos. Se seleccionaron 29 muestras (21 resistentes y 8 sensibles) y se conformaron dos grupos de trabajo, uno de muestras con exposición al fluconazol y el otro sin esta. El ARN extraído se cuantificó mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (RT-qPCR). Resultados. Se encontraron diferencias significativas en la expresión del gen MDR1 en el grupo de cepas de C. albicans resistentes. Dos de las cepas resistentes (104 y 62-2) expuestas al antifúngico presentaron valores muy elevados en la expresión de este gen. La expresión del ERG11 y del CDR1 no fue significativa en los grupos estudiados. Conclusión. El aumento de sobreexpresión del gen MDR1 indica que este puede ser el responsable de la resistencia; sin embargo, algunas cepas resistentes no sobreexpresaron los genes analizados, lo que indica que puede haber otros genes involucrados en la resistencia de las cepas estudiadas.

Introducción. Las infecciones oportunistas asociadas con Candida albicans han tenido gran repercusión en la salud pública por la mortalidad que generan en determinados grupos poblacionales. Aunque existen tratamientos farmacológicos disponibles, es evidente el aumento de la resistencia desarrollada por el agente patógeno, por lo que la determinación de los mecanismos de resistencia de las cepas presentes en las áreas hospitalarias es importante, ya que permitiría plantear mejores esquemas de tratamiento. Objetivo. Analizar la expresión de los genes ERG11, CDR1 y MDR1 en cepas de C. albicans aisladas de adultos mayores a su ingreso en la unidad de cuidados intensivos del Hospital Santa Sofía de Manizales, Colombia. Materiales y métodos. Se seleccionaron 29 muestras (21 resistentes y 8 sensibles) y se conformaron dos grupos de trabajo, uno de muestras con exposición al fluconazol y el otro sin esta. El ARN extraído se cuantificó mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (RT-qPCR). Resultados. Se encontraron diferencias significativas en la expresión del gen MDR1 en el grupo de cepas de C. albicans resistentes. Dos de las cepas resistentes (104 y 62-2) expuestas al antifúngico presentaron valores muy elevados en la expresión de este gen. La expresión del ERG11 y del CDR1 no fue significativa en los grupos estudiados. Conclusión. El aumento de sobreexpresión del gen MDR1 indica que este puede ser el responsable de la resistencia; sin embargo, algunas cepas resistentes no sobreexpresaron los genes analizados, lo que indica que puede haber otros genes involucrados en la resistencia de las cepas estudiadas.

Análisis cuantitativo de la expresión de genes de resistencia a fluconazol en cepas de Candida albicans aisladas al ingreso de adultos mayores a una unidad de cuidados intensivos de Manizales, Colombia / Quantitative analysis of the expression of fluconazole-resistant genes in strains of Candida albicans isolated from elderly people at their admission in an intensive care unit in Manizales, Colombia

Introducción. Las infecciones oportunistas asociadas con Candida albicans han tenido gran repercusión en la salud pública por la mortalidad que generan en determinados grupos poblacionales. Aunque existen tratamientos farmacológicos disponibles, es evidente el aumento de la resistencia desarrollada por el agente patógeno, por lo que la determinación de los mecanismos de resistencia de las cepas presentes en las áreas hospitalarias es importante, ya que permitiría plantear mejores esquemas de tratamiento. Objetivo. Analizar la expresión de los genes ERG11, CDR1 y MDR1 en cepas de C. albicans aisladas de adultos mayores a su ingreso en la unidad de cuidados intensivos del Hospital Santa Sofía de Manizales, Colombia. Materiales y métodos. Se seleccionaron 29 muestras (21 resistentes y 8 sensibles) y se conformaron dos grupos de trabajo, uno de muestras con exposición al fluconazol y el otro sin esta. El ARN extraído se cuantificó mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (RT-qPCR). Resultados. Se encontraron diferencias significativas en la expresión del gen MDR1 en el grupo de cepas de C. albicans resistentes. Dos de las cepas resistentes (104 y 62-2) expuestas al antifúngico presentaron valores muy elevados en la expresión de este gen. La expresión del ERG11 y del CDR1 no fue significativa en los grupos estudiados. Conclusión. El aumento de sobreexpresión del gen MDR1 indica que este puede ser el responsable de la resistencia; sin embargo, algunas cepas resistentes no sobreexpresaron los genes analizados, lo que indica que puede haber otros genes involucrados en la resistencia de las cepas estudiadas.

Introduction: Opportunistic infections associated with Candida albicans have had a great impact on public health due to the mortality they generate in certain population groups. Although pharmacological treatments are available, the resistance developed by the pathogen has become increasingly evident. For this reason, determining the mechanisms of resistance associated with the strains found in different hospital areas is important since it would help improving treatment plans. Objective: To analyze the expression of ERG11, CDR1, and MDR1 genes in strains of C. albicans isolated from elderly patients at admittance in the intensive care unit of Hospital Santa Sofía in Manizales, Colombia. Materials and methods: A total of 29 samples (21 resistant and 8 sensitive) were selected and distributed in two working groups: with and without exposure to fluconazole. The extracted RNA was quantified by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR). Results: Significant differences were found in the expression of the MDR1 gene in the group of resistant C. albicans strains. Two of the resistant strains (104 and 62-2) exposed to the antifungal showed very high values in the expression of this gene. The expression of ERG11 and CDR1 was not significant among the groups studied. Conclusion: The increased overexpression of the MDR1 gene indicates that it may be responsible for the resistance. However, some resistant strains did not overexpress any of the genes analyzed, which indicates that there may be other genes involved in the resistance of the strains under study.

Caracterización de fallecidos por Infarto de Miocardio en una Unidad de Cuidados Coronarios Intensivos / Characterization of patients who died after a Myocardial Infarction in an Intensive Coronary Care Unit

Introducción: Las enfermedades cardiovasculares constituyen un serio problema de salud a nivel mundial, la cardiopatía isquémica representa gran parte de este problema del cual Cuba no está exenta. Objetivo: Caracterizar a los pacientes fallecidos por infarto agudo de miocardio en la Unidad de cuidados coronarios intensivos del Hospital clínico-quirúrgico Comandante Manuel Fajardo en el período comprendido entre junio 2009 a marzo 2017. Material y Métodos: Estudio observacional, descriptivo, de corte transversal con un universo de 50 pacientes fallecidos por infarto agudo de miocardio. Resultados: Edad media de 62,6 años ± 7. Predominó el infarto de localización anterior (76 por ciento), unido a los pacientes con Killip-Kimball III - IV y con TIMI de riesgo bajo con un (68 por ciento) y (40 por ciento) respectivamente. El 56 por ciento del universo no recibió terapia de reperfusión y el shock cardiogénico (40 por ciento) fue constatado como complicación más presentada. Conclusiones: Predominaron los pacientes con infarto de cara anterior y los de clasificación de Killip-Kimbal III-IV, sin asociación estadísticamente significativa entre ambas variables. También fueron mayoría los no trombolizados y los que presentaron shock cardiogénico como complicación, aunque estas variables tampoco mostraron asociación estadísticamente significativa(AU)

Introduction: Cardiovascular diseases are a serious health problem worldwide. Ischemic Cardiopathy represents a high percentage of this problem, and Cuba is not excluded. Objective: To characterize patients who died after Acute Myocardial Infarction in the Intensive Coronary Care Unit of the Clinical-Surgical Hospital Comandante Manuel Fajardo in the period from June 2009 to March 2017. Material and Methods: Observational, descriptive, cross-sectional study with a universe of 50 patients who died of acute myocardial infarction. Results: The mean age was 62.6 ± 7 years. The anterior myocardial infarction predominated (76 percent), together with patients classified according to Killip-Kimball III-IV criteria that also had low TIMI risk (68 percent and a 40 percent, respectively). 56 percent of the universe of patients was not thrombosed, and cardiogenic shock (40 percent) was confirmed as the most common complication. Conclusions: Patients with anterior myocardial infarction and Killip-Kimbal III-IV classification predominated in the study, without statistically significant association between these two variables. Most patients were not thrombosed and they were the ones who presented cardiogenic shock as a complication, although these variables also showed no statistically significant association(AU)

Concentraciones de hormona estimulante de la tiroides y tiroxina libre en ovinos jóvenes / Concentrations of thyroid-stimulating hormone and free thyroxine in young sheep / Concentrações de hormônio estimulador da tireoide e tiroxina livre em ovinos jovens

Resumen: El objetivo de esta investigación fue establecer valores de referencia en las concentraciones de la hormona estimulante de la tiroides (TSH, del inglés Thyroid-Stimulating Hormone) y tiroxina (T4) libre, para los pequeños rumiantes menores de 7 meses, analizando la influencia del sexo sobre las determinaciones. Se obtuvieron muestras de sangre de 48 ovinos en estado de ayuno (25 machos y 23 hembras menores de 7 meses de edad), las concentraciones de TSH y T4 libre se determinaron mediante inmunoensayo enzimático. Los valores de TSH para las hembras jóvenes (μUI/ml) fueron: promedio, mínimo, máximo y desviación estándar de 0,34; 0,0; 0,57; 0,15, respectivamente. Para los machos jóvenes fueron: 0,09; 0,0; 0,57; 0,15, respectivamente. El valor p del test F fue 0,147 (p ≥ 0,05), por lo cual no hay diferencia estadísticamente significativa con una confiabilidad de 95 % para la TSH en ovinos jóvenes con respecto al género. Los valores de T4 libre para las hembras jóvenes (ng/dl) fueron: promedio, mínimo, máximo y desviación estándar de 0,44; 0,13; 0,73; 0,21, respectivamente. Para los machos jóvenes fueron: 0,66; 0,31; 1,17; 0,24, respectivamente. El valor de p del test F es 0,04 (p < 0,05), lo cual evidencia diferencia significativa con una confiabilidad del 95 % para los valores de T4 libre en ovinos jóvenes. Se concluye que el sexo causa variación en la secreción de T4 libre en los pequeños rumiantes jóvenes.

Abstract: This research aimed to establish reference values of thyroid-stimulating hormone (TSH) and free thyroxine (T4) in small ruminants under seven months old, by analyzing the influence of gender on determined values. Blood samples were collected from 48 fasting sheep (25 males and 23 females under 7 months old), and TSH and free T4 levels were determined using enzyme immunoassay. Average, minimum, maximum, and standard deviation values for TSH (μUI/ml) in young females were: 0.34; 0.0; 0.57; 0.15, respectively. In young males, they were: 0.09; 0.0; 0.57; 0.15, respectively. The F-test p-value was 0.147 (p ≥) 0.05), which indicates that there is no statistically significant difference with a reliability of 95% for TSH in young sheep with regard to gender. Average, minimum, maximum, and standard deviation values for free T4 (ng/dL) in young females were: of 0.44; 0.13; 0.73; 0.21, respectively. In young males, the values were: 0.66; 0.31; 1.17; 0.24, respectively. The F-test p-value was 0.04 (p <0.05), which shows a significant difference with a reliability of 95% for free T4 values in young sheep. The study concludes that sex causes variation in the secretion of free T4 in young small ruminants.

Resumo: O objetivo de esta investigação foi estabelecer valores de referência nos níveis de hormônio estimulador da tireoide (TSH) e tiroxina (T4) livre, para os pequenos ruminantes menores de sete meses, analisando a influência do sexo sobre as determinações. Se obtiveram amostras de sangue de 48 ovinos em estado de jejum (25 machos e 23 fêmeas menores de 7 meses de idade), os níveis de TSH e T4 livre se determinaram mediante imunoensaio enzimático. Os valores de TSH para as fêmeas jovens (μUI/ml) foram: média, mínimo, máximo e desvio padrão de 0,34; 0,0; 0,57; 0,15, respectivamente. Para os machos jovens foram: 0,09; 0,0; 0,57; 0,15, respectivamente. O valorp do teste F foi 0,147 (p ≥ 0,05), razão pela qual não há diferença estatisticamente significativa com uma confiabilidade de 95 % para a TSH em ovinos jovens com respeito ao gênero. Os valores de T4 livre para as fêmeas jovens (ng/dL) foram: em média, mínimo, máximo e desvio padrão de 0,44; 0,13; 0,73; 0,21, respectivamente. Para os machos jovens foram: 0,66; 0,31; 1,17; 0,24, respectivamente. O valor de p do teste F é 0,04 (p< 0,05), o que evidencia diferença significativa com uma confiabilidade do 95 % para os valores de T4 livre em ovinos jovens. Se conclui que o sexo causa variação na secreção de T4 livre nos pequenos ruminantes jovens.

Porous silicon microparticle potentiates anti-tumor immunity by enhancing cross-presentation and inducing type I interferon response.

Micro- and nanometer-size particles have become popular candidates for cancer vaccine adjuvants. However, the mechanism by which such particles enhance immune responses remains unclear. Here, we report a porous silicon microparticle (PSM)-based cancer vaccine that greatly enhances cross-presentation and activates type I interferon (IFN-I) response in dendritic cells (DCs). PSM-loaded antigen exhibited prolonged early endosome localization and enhanced cross-presentation through both proteasome- and lysosome-dependent pathways. Phagocytosis of PSM by DCs induced IFN-I responses through a TRIF- and MAVS-dependent pathway. DCs primed with PSM-loaded HER2 antigen produced robust CD8 T cell-dependent anti-tumor immunity in mice bearing HER2+ mammary gland tumors. Importantly, this vaccination activated the tumor immune microenvironment with elevated levels of intra-tumor IFN-I and MHCII expression, abundant CD11c+ DC infiltration, and tumor-specific cytotoxic T cell responses. These findings highlight the potential of PSM as an immune adjuvant to potentiate DC-based cancer immunotherapy.

COMPARACIÓN DE MÉTODOS CONVENCIONALES Y MOLECULARES PARA LA DETECCIÓN DE Giardia lamblia EN HECES HUMANAS / COMPARISON OF CONVENTIONAL AND MOLECULAR METHODS FOR DETECTION OF Giardia lamblia IN HUMAN FEACES

Los protozoarios del género Giardia representan algunos de los parásitos humanos más comunes en el mundo y están entre los principales causantes de infecciones gastrointestinales y enfermedades diarreicas en humanos. La detección del parásito se fundamenta generalmente en los métodos por concentración y microscopía convencional, pero estas técnicas presentan limitaciones por su baja sensibilidad e inespecificidad en el diagnóstico. En procura de mejorar los métodos de diagnóstico, las técnicas moleculares se perfilan como una alternativa promisoria. En este estudio se analizaron 88 muestras de heces provenientes de pacientes de una empresa prestadora de servicios de salud (ASSBASALUD) de la ciudad de Manizales (Caldas). Para la detección de Giardia lamblia en heces se compararon tres métodos diferentes por medio del porcentaje de positividad: los métodos convencionales de concentración de la muestra y observación microscópica, análisis por inmunoensayo (ELISA indirecto) y finalmente la amplificación de dos secuencias génicas nucleares por PCR. Se obtuvieron tres muestras positivas por concentración y microscopía convencional, dos por inmunoensayo y 26 por técnicas moleculares. El estudio sugiere que las pruebas diagnósticas rutinarias basadas en microscopía convencional e inmunoensayo, tienen más bajo porcentaje de detección de este parásito y que esta deficiencia puede ser compensada por medio de la implementación de métodos de diagnóstico molecular basados en PCR, como una estrategia complementaria de apoyo en el diagnóstico de este protozoo.

The protozoa of the genus Giardia represent one of the most common human parasites in the world and are among the main causes of gastrointestinal infections and diarrheal diseases in humans. Parasite detection is generally based on concentration and conventional microscopy methods, but these techniques have limitations due to their low sensitivity and specificity in diagnosis. In an attempt to improve the diagnostic methods, molecular techniques are emerging as a promising alternative. In this study 88 stool samples from patients of a company that provides health services (ASSBASALUD) in the city of Manizales (Caldas) were analyzed. In order to detect Giardia lamblia in stool, three different methods were compared using the positivity percent: conventional methods for concentration of the sample and microscopic observation, analysis by immunoassay (indirect ELISA) and finally the amplification of two nuclear gene sequences by PCR. Three positive samples were obtained by concentration and conventional microscopy, two by immunoassay and 26 by molecular techniques. The study suggests that routine diagnostic tests based on conventional microscopy and immunoassay have lower detection rate of this parasite and that this deficiency can be compensated by means of the implementation of molecular diagnostic methods based on PCR, as a complementary strategy to support the diagnosis of this protozoan.

Comparación de oos métodos para la determinación de los niveles de colesterol hdl en caninos / Comarison of twoo methods for determining hdl cholesterol levels in caniees

Objetivo: Comparar el método directo y el método de precipitación para la medición del colesterol HDL en caninos. Materiales y Métodos: Se obtuvieron muestras de sangre de 156 caninos, en estado de ayuno, de las cuales se seleccionaron 30 al azar de diferentes edades, sin discriminación de sexo ni edad. Después de obtener el suero se determinaron los niveles de colesterol HDL mediante el método directo, posteriormente fueron obtenidos los niveles de colesterol HDL utilizando el método de precipitación. Los resultados fueron analizados estadísticamente mediante ANOVA de una vía. Resultados: El método directo reportó valores (mg/dl) de media, desviación estándar, rango mínimo y máximo de: 144,435; 33,532; 77,676; 197,594 respectivamente; mediante el método de precipitación se obtuvieron valores (mg/dl) de media, desviación estándar, rango mínimo y máximo de: 133,337; 36,727; 81,457; 242,724 respectivamente. El valor P del test F es mayor o igual a 0,05 (0,627), por lo cual, no se evidencia diferencia estadísticamente significativa con un nivel de confidencia del 95% entre los valores obtenidos por los dos métodos. Conclusión: Al no existir diferencia significativa, puede ser utilizado cualquiera de los dos métodos analizados para la determinación del colesterol HDL en esta especie.

Objective: To compare the direct method and the precipitation method for the measurement of HDL cholesterol in canines. Materials and Methods: Blood samples of 156 fasting dogs were obtained from which 30 from different ages were randomly chosen without discrimination by sex or age. After serum extraction, levels of HDL cholesterol were determined by the direct method and and by the precipitation method. The results were statistically analyzed using one way ANOVA. Results: The values obtained by the direct method in mg/dl for media, minimal and maximal range, and standard deviation were 144,435; 33,532; 77,676; 197,594 respectively. Using the precipitation method, the values for media, minimal and maximal range, and standard deviation were: 133,337; 36,727; 81,457; and 242,724 respectively. The P value for the F test was greater or equal to 0.05 (0.627) without significant statistical difference between the two analyzed methods with a confidence level of 95% between the values obtained in both methods. Conclusion: Since there is not a significant difference, either of the analyzed methods for determining HDL cholesterol in this species can be used.

Validación de l fórmula de friedewald para la determinación del perfil lipídico en oovinos / Valiation of friiedewald's formula for determining cattle lipid profile

Objetivo: Validar la fórmula de Friedewald para la determinación de los valores de colesterol LDL en bovinos, una especie con patrón metabólico HDL. Materiales y Métodos: Fueron tomadas 100 muestras de sangre de bovinos de diferente edad, raza y sexo. Luego de extraer el suero, fueron determinados los niveles de colesterol LDL mediante el método directo, posteriormente se determinaron los mismos valores utilizando la fórmula de Friedewald. Los resultados fueron analizados estadísticamente mediante ANOVA de una vía. Resultados: El método directo reportó valores (mg/dl) de promedio, mínimo, máximo, y desviación estándar de 40,769; 2,438; 126,751; 29,814, respectivamente, y el método de Friedewald mostró resultados en promedio, mínimo, máximo y desviación estándar de 34,659; 1,349; 145,31; 29,108, correspondientemente. El valor de P en el test F en la comparación del método Directo vs. Friedewald fue mayor o igual a 0,05 (0,154), por lo cual no se evidenció diferencia significativa a un nivel de confianza del 95% entre los valores obtenidos por los dos métodos. Conclusión: Puede ser utilizada la fórmula de Friedewald para la determinación del colesterol LDL en especies con patrón HDL.

Objective: To validate Friedewald's formula for determing LDL cholesterol levels in cattle, species with HDL metabolic pattern. Materials and Methods: One hundred (100) blood samples from different age, race and gender cattle were taken. After removing the serum, the LDL cholesterol levels were determined using the direct method and later the same values were determined using Friedewald's formula. Results were statistically analyzed using one-way ANOVA. Results: The direct method reported values (mg/dl) of average, minimum range, maximum range, and standard deviation of 40.769, 2.438, 126.751, 29.814, respectively, and Friedewald method results showed minimum, maximum and standard deviation averages of 34.659, 1.349, 145.31, 29.108, respectively. The value of P in the F test Direct in the comparison of the direct method and Friedewald's method was greater than or equal to 0.05 (0.154), reason why no significant difference was evident at a level of confidence of 95% between the values obtained through the two methods. Conclusion: Friedewald's formula can be used for determining LDL cholesterol in species with HDL pattern.

Evaluación de los métodos directo, precipitado y Friedewald para la cuantificación de colesterol LDL y HDL en pollos de engorde / Assessment of the Direct, Precipitated and Friedewald Methods for Quantifying LDL and HDL Cholesterol in Broilers

El objetivo fue evaluar los métodos directo y precipitado para el colesterol de las lipoproteínasde alta densidad y los métodos directo, precipitado y Friedewald para el colesterol de las lipoproteínas de baja densidad en pollos de engorde. Se obtuvo suero de 30 pollos de engorde de 36 días de edad, en ayunas, de la línea Cobb 500, se determinaron los niveles de triglicéridos y colesterol total usando un kit enzimático-colorimétrico. El colesterol, tanto de las lipoproteínasde alta densidad como de las de baja densidad, se midió por el método de precipitación y el método directo, y la estimación del colesterol de la lipoproteína de baja densidad se determinó usando la fórmula de Friedewald. Las medias ± desviación estándar para los niveles de colesterol de las lipoproteínas de alta densidad, por los métodos directo y precipitado, en mg/dl, fueron de: 92,8 ± 16,7; 92,2 ± 16,3, respectivamente. El valor P del test F es mayor a 0,05, por lo cual no hay diferencia estadísticamente significativa, con un índice de confianza de 95 % entre métodos, y para los niveles de colesterol de la lipoproteínas de baja densidad por los métodos directo, precipitado y Friedewald, en mg/dl, fueron: 51,8 ± 9,4; 21,9 ± 12,6y 26,1 ± 12,9, respectivamente. El valor P del test F es inferior a 0,05 evidenciando diferencia estadísticamente significativa, con un índice de confianza de 95 % entre métodos. Se concluye que en los pollos de engorde se puede cuantificar el colesterol de la lipoproteína de alta densidad con los dos métodos evaluados (directo y precipitado), sin embargo, para calcular el colesterol de la lipoproteína de baja densidad solo se recomienda utilizar el método directo ya que los métodos de precipitado y de Friedewald dieron resultados mucho menores en dicha especie...

The objective was to evaluate the direct and precipitated methods for cholesterol from highdensitylipoprotein, and the direct, precipitated and Friedewald methods for cholesterolfrom low-density lipoprotein in broilers. Serum was obtained from thirty 36-day old fastingbroilers from the Cobb 500 line; triglyceride and total cholesterol levels were determinedusing an enzymatic-colorimetric kit. Cholesterol, both of high and low density lipoprotein,was measured by the precipitation method and the direct method, and the estimation ofthe low density lipoprotein cholesterol was determined using the Friedewald formula. Themean ± standard deviation for cholesterol levels of high density lipoprotein by the direct and precipitated methods in mg/dl, were: 92.8 ± 16.7, 92.2 ± 16.3, respectively. The f-testp-value is higher than 0.05, and therefore there is no statistically significant difference, witha confidence index of 95 % between methods, and for the cholesterol levels of low densitylipoprotein by the direct, precipitated and Friedewald methods, in mg/dl, they were: 51.8 ±9.4; 21.9 ± 12.6 and 26.1 ± 12.9 respectively. The f-test p-value is less than 0.05, demonstratinga statistically significant difference, with a confidence index of 95 % between methods.It is concluded that, in broilers, high-density lipoprotein cholesterol can be quantified bymeans of both of the evaluated methods (direct and precipitated); however, only the directmethod is recommended to calculate low density lipoprotein cholesterol, as the precipitatedand Friedewald methods gave much lower results in that species...

O objetivo foi avaliar os métodos direto e precipitado para o colesterol das lipoproteínas dealta densidade e os métodos direto, precipitado e Friedewald para o colesterol das lipoproteínasde baixa densidade em frangos de engorde. Obteve-se soro de 30 frangos de engordede 36 dias de idade, em jejum, da linha Cobb 500, determinaram-se os níveis de triglicéridese colesterol total usando um kit enzimático-colorimétrico. O colesterol, tanto das lipoproteínasde alta densidade como das de baixa densidade, foi medido pelo método de precipitaçãoe o método direto, e a estimativa do colesterol da lipoproteína de baixa densidadedeterminou-se usando a fórmula de Friedewald. As médias ± desvio padrão para os níveis decolesterol das lipoproteínas de alta densidade, pelos métodos direto e precipitado, em mg/dl,foram de: 92,8 ± 16,7; 92,2 ± 16,3, respectivamente. O valor P do teste F é maior a 0,05,pelo qual não há diferença estadisticamente significativa, com um índice de confiança de95 % entre métodos, e para os níveis de colesterol das lipoproteínas de baixa densidade pelosmétodos direto, precipitado e Friedewald, em mg/dl, foram: 51,8 ± 9,4; 21,9 ± 12,6 e 26,1 ±12,9, respectivamente. O valor P do teste F é inferior a 0,05 evidenciando diferença estatisticamentesignificativa, com um índice de confiança de 95 % entre métodos. Conclui-se quenos frangos de engorde se pode quantificar o colesterol da lipoproteína de alta densidadecom os dois métodos avaliados (direto e precipitado), porém, para calcular o colesterol dalipoproteína de baixa densidade só se recomenda utilizar o método direto já que os métodosde precipitado e de Friedewald deram resultados muito menores nessa espécie...